编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第PAGE17页共NUMPAGES17页第PAGE\*MERGEFORMAT17页共NUMPAGES\*MERGEFORMAT17页《食用菌生产技术》实训指导教材实训一食用菌形态结构观察一、目的要求观察食用菌菌丝体的生长状态，利用显微镜认识食用菌的营养体和繁殖体的微观结构，利用徒手切片观察食用菌子实体的微观结构，通过对食用菌子实体形态特征的观察，让学生们了解和熟悉各种食用菌子实体的类型和特征，并能根据子实体的外形进行分类。二、实训准备1、材料平菇、香菇、双孢蘑菇、草菇、金针菇、木耳、银耳、猴头菇、灵芝、密环菌、羊肚菌、虫草、茯苓等食用菌子实体或菌核浸浸标本或干标本、鲜标本及部分食用菌的菌丝体，担孢子等。2、仪器工具光学显微镜（100～600倍）、接种针、无菌水滴瓶、染色剂（石炭酸复红或美蓝等）、酒精灯、75%酒精瓶、火柴、载玻片、盖玻片、刀片、培养皿、绘图纸、铅笔等。三、内容和方法步骤（一）菌丝体形态特征观察1、菌丝体宏观形态观察。①观察平菇、草菇、金针菇、木耳、银耳及香灰菌、蘑菇、猴头、灵芝等食用菌的试管斜面菌种或PDA平板上生长的菌落，比较其气生菌丝的生长状态，并观察菌落表面是否产生无性孢子。②观察菌丝体的特殊分化组织：蘑菇菌柄基部的菌丝束；密环菌的菌索；茯苓的菌核；虫草等子囊菌的子座。2、菌丝体微观形态观察。①菌丝水浸片的制作：取一载玻片，滴一滴无菌水于载片中央，用接种针挑取少量平菇菌丝于水滴中，用两根接种针将菌丝拔散。盖上盖玻片，避免气泡产生。②显微观察：将水浸片置于显微镜的载物台上，先用10倍的物镜观察菌丝的分支状态，然后转到40倍物镜下仔细观察菌丝的细胞结构等特征，并辩认有无菌丝锁状联合的痕迹。（二）子实体形态特征观察1、子实体宏观形态观察。仔细观察各种类型的食用菌子实体的外部形态特征，并比较各种子实体的主要区别，特别注意菌盖、菌柄、菌褶（或菌孔、菌刺）、菌环、菌托的特征，并对之进行比较、分类。2、子实体微观形态观察。①菌褶切片观察：取一片平菇菌褶置于左手，右手持刀片，横切菌褶若干薄片漂浮于培养皿的水中，用接种针先取最薄的一片制作水浸片，显微观察平菇担子及担孢子的形态特征。②有性、无性孢子的观察：灵芝担孢子水浸片观察；羊肚菌子囊及子囊孢子水浸片观察；草菇厚垣孢子水浸片观察；银耳芽孢子水浸片观察（以上各类孢子的观察可用标本片代替）。四、作业1、描述菌丝体的生长状态，并画出所观察菌丝、无性孢子、担子及担孢子的形态结构图。2、列表说明所观察各种类型的食用菌子实体的形态特征，如：伞状、头状、耳状、花絮状、肾状、扇状、蛋形、钟形等。3、绘制一种食用菌子实体的形态图，用绘图笔或钢笔（黑）绘制生物图，要求图形真实、准确、自然，画面整洁。实训二食用菌母种培养基的配制一、目的要求了解高压蒸汽灭菌锅的构造，了解食用菌母种培养基的配方，熟悉高压蒸汽灭菌锅的使用方法，掌握母种培养基（PDA或PSA）的配制方法二、实训准备1、配制培养基材料马铃薯、葡萄糖（或蔗糖）、琼脂、水等。2、仪器用具高压蒸汽灭菌锅（手提式或立式）、可调式电炉、铝锅（20cm）、汤勺、切刀、切板、量杯、纱片、漏斗（带胶管和玻璃管）、止水夹、漏斗架、试管（18mm×180mm或20mm×200mm）、1cm厚的长形木条（摆放斜面时垫试管用）、棉花（未脱脂）、捆扎绳、标签、天平等。三、内容和方法步骤（一）母种培养基（PDA或PSA）配方马铃薯200g，葡萄糖（或蔗糖）20g，琼脂15～20g，水1000ml，pH自然。（二）母种培养基配制1、熬制。先将马铃薯洗净，挖芽去皮，准确称取200g，然后将马铃薯切成玉米大小的颗粒或薄片。用量杯量取1000～1200ml水于铝锅内煮马铃薯，待水沸后计时20～25min，当马铃薯酥而不烂时，用双层纱布进行过滤于量杯中，洗净铝锅滤渣，将滤液到回锅中继续以文火加热，加入葡萄糖（或蔗糖）和琼脂，待琼脂溶化，不断搅拌，以免糊锅，注意补足水量。2、分装。将熬面的培养基保持文火，趁热分装。用勺将培养基加入漏斗中，左手握2～5支试管，右手持漏斗下面的玻璃管入试管口内，同时放开止水夹，让培养基逐个流入试管内，培养基高度约为试管长度的1/6～1/5，约10～15ml，注意避免将培养基沾于试管口内外。分装后的试管，在培养基凝固前必须立放。3、制棉塞。用叠放式将未脱脂棉做成棉球，塞入试管口，管口内棉塞底部要求光滑，棉塞侧面要求无褶皱，棉塞长度的2/3在管口内，1/3在管口外。棉塞的松紧以手提棉塞轻晃试管不滑出为度。捆把。以10支试管为一捆，用捆扎绳扎紧。贴上标签，准备灭菌。（三）培养基的灭菌1