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姓名与学号竺涵宇3110100279指导教师叶尊忠专业与班级生物系统工程1102磁分离装置设计作业要求:设计一种适用于生物传感器检测前处理的磁分离装置(可以是便携装置)2.写出原理、结构原理图、设计思路、使用方法等原理:免疫磁性微球是免疫学和磁载体技术结合而发展起来的一类新型材料。IMB是包被有抗体的磁性微球,可与含有相应抗原的靶物质特异性地结合形成新的复合物。通过磁场时,这种复合物可被滞留,与其它组分相分离,该过程称为免疫磁性分离法。免疫磁性分离简便易行,分离纯度高,保留靶物质活性,且高效、快速、低毒,可广泛应用于细胞分离和提纯、免疫检测、核酸分析和基因工程、作靶向释药的载体等领域。结构原理图:设计思路:本装置的磁分离检测主要包括4个步骤:生物素化抗体、制备抗体包被的免疫磁珠、捕获并分离目标病毒、阻抗测量。生物素标记试剂可与蛋白质链上的氨基形成稳定的酰胺键,从而对抗体进行标记。通过生物素与链霉亲和素之间的高度亲和力,使标记生物素的抗体与表面修饰链霉亲和素的磁珠结合,形成抗体包被的免疫磁珠。当样品中存在目标病毒时,免疫磁珠能够捕获病毒,形成磁珠-抗体-检测物复合物。该复合物在外加磁场作用下定向移动并吸附于管壁内侧后,移除废液,从而实现了目标检测物与样品中其它非目标分析物的分离。对照品悬液在制备过程中使用PBS缓冲液替代检测物溶液,其它制备步骤与上述样品悬液的制备步骤相同。采用叉指阵列微电极分别测量对照品和样品的阻抗谱,通过两者间的差值判断样品中是否含有目标检测物。使用方法:将25μL表面修饰链霉亲和素的150nm磁珠、50μL生物素化的抗体溶液和100μLPBS缓冲液加入经1%BSA封闭的1.5mL离心管内,置于旋转混合器中以15r/min的速度旋转混合,利用生物素与链霉亲和素之间的高度亲和力,将抗体连接到150nm磁珠表面。旋转混合30min后,将离心管置于磁分离器中进行磁分离,移除废液,即完成了免疫磁珠的制备。在免疫磁珠中加入200μLPBS缓冲液为对照品,加入200μL待检验溶液作为待测样品,于室温下旋转混合,样品中的目标检测物与磁珠表面的抗体发生免疫结合后,采用磁分离器进行磁分离并移除废液。
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