PAGEPAGE1生物科学热门话题知识讲座结课论文编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第PAGE15页共NUMPAGES16页第PAGE\*MERGEFORMAT15页共NUMPAGES\*MERGEFORMAT16页生物技术在食品检测方面的应用摘要:综述了DNA探针、PCR、生物芯片、胶体金免疫层析及ELLSA等生物技术的基本原理及其在食品检测方面的应用。关键词:生物技术DNA探针PCR生物芯片胶体金免疫层析ELLSA食品检测ApplicationofBiologicalTechniquesforDetectioninFoodsXieXiuzhi(GuangzhouAgriculturalStandardandSupervisoryCenter,Guangzhou510315)Abstract:Theprimaryprinciplesofseveralbiologicaltechniques,includingDNAprobe,PCR,bio2chips,immuno2chromatographicassay(ICA)andELLSAwereintroduced,andmeanwhile,theirapplicationintheregionsoffoodsafetyandqualitycontrolweremainlydiscussed1Keywords:BiologicaltechniquesDNAprobePCRBio2chipsICAELLSAFooddetection当前,我国农产(食)品质量安全问题受到社会广泛关注,仅靠常规的化学检测已不能满足快速判定的需要。一些简便、敏感、准确、省力、省成本的快速检测方法越来越多地被运用到食品安全性检测中。食品安全及质量与人们生活健康息息相关,也是影响食品工业发展及对外贸易的重要因素。长期以来,广泛应用的物理、化学、仪器等食品检测方法已不能满足现代食品检测的需要。一些简便、敏感、准确、省力、省成本的快速检测方法越来越多地被运用到食品安全性检测中。近些年发展的生物技术检测方法因其特异的生物识别功能,极高的选择性,且精确、灵敏、快速、成本低廉,在食品科学领域中得到了广泛应用,尤其是在检测致病性微生物、转基因食品等方面不可或缺。就近几年食品检测中常用的几种生物技术,诸如核酸杂交、PCR、生物芯片、生物传感器等做以介绍。1DNA探针技术1、1基本原理DNA探针技术又名核酸分子杂交技术,即两条不同来源的核酸链如果具有互补的碱基序列,就能够特异性地结合而成为分子杂交链。在已知的DNA或RNA片段上加上可识别的标记(如32P同位素标记,生物素等),制成DNA探针,即可检测未知样品中是否具有与其互补的序列[1,2],检测出样品中是否含有此种微生物。近年来DNA探针技术在食品微生物检测中的应用十分广泛,目前已可以用DNA探针检测食品中的大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、李斯特氏菌[3-5]等。1、2DNA探针技术在食品检测中的应用[1]DNA探针用于食品中微生物检测的关键是DNA探针的构建。为保证检测结果的高度特异性,必须根据具体的检测目标,构建不同的DNA探针。构建DNA探针是以待检微生物中特异性保守基因序列为目标DNA,以该序列的互补DNA作为杂交探针,对一般微生物而言,可以用决定该微生物特有的生理、生化特征的基因序列构建特异性的DNA探针。周志江[6]等用生物素标记的编码大肠杆菌耐热毒素(ST)的DNA片段作为基因探针,检测了污染食品中的产ST大肠杆菌。Moseley等(1994)利用生物素标记的克隆沙门氏菌DNA片段作为基因探针,检测临床样品、食品及饲料样品中的沙门氏菌,敏感性为80个细菌/g。Hill等曾用[a232P]标记的DNA探针检测污染食品中的产热敏性肠毒素(LT)的大肠杆菌,其敏感性达100个细菌/g。陈倩等[7]对从食品中以血清学初筛分离出的78株ESIEC菌株,以rp2z为探针检测其HPI毒力岛基因,结果检出了7株,可鉴定为ESIEC大肠杆菌。传统的用放射性同位素标记的DNA探针技术,具有半衰期短,对人体有危害,作为常规诊断、特别是在食品检测实验室中不太适用;生物素标记的DNA探针在紫外线照射下易分解,且易出现非特异性反应。近年来不少实验室采用地高辛代替进行标记,其毒性相对较小,应用越来越广泛。因此DNA探针技术在食品微生物检测中不失为一种有效的检测技术。2PCR及其改进技术在食品检测中的应用2、1传统PCR技术聚合酶链反应(polymerasechainreation,PCR)是1985年诞生的一项体外扩增DNA的方法[8