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前言由于师兄师姐们用的移液枪主要是出自Eppendorf(艾本德拂)公司,精确性好=>在这里,主要以它作为示范。Slide2:设计原理向下压→弹簧收缩→活塞向下运动→排出气体→伸入液面以下(故:气体无法再进入)→放开按扭→负压→在大气压的作用下,液体进入吸头→吸液成功。Slide3:(一)移液器Reference®、Research:产品的两种系列Reference系列:(单道为主)提供从0.1-2500µl范围9种可调量程的移液器;也提供从0.1-2500µl范围16种固定量程的移液器Research系列:(多道为主)多道移液器→8道和12道移液器加样部件=>可轻松便捷地进行更换Slide5:外置活塞式移液器Slide6(二)电动VS手动电动移液器:A:恒定的吸、放液速度=>将操作者本身带来的误差控制在最小范围=>准确度高;B:一次吸液,多次分液的可编程式操作功能=>省时C:速度可调=>适应各种粘度液体手动移液器:A:速度完全只能靠操作者自身的操作方式和客观的感觉来控制=>准确度低些;Slide8调大后调小Because:计数器里面有一定的空隙,需要弥补。(?)Slide9If:大量程取小体积=>:A打不干净;B损失更多;Slide1035%-100%:如:需量取10ul,则→选用:1-10(100%)ul;2-20(50%)ul不用:20-200(5%)ul;100-1000(1%)ulSlide11匹配性不好:如1-10ul的枪插20-200ul的黄吸头Slide17:正常情况下需要润洗But:但是对于高温或低温样品,吸头润洗反而降低操作准确性,请使用者特别注意。(热涨冷缩?)C:新吸头吸取有机溶剂、高挥发液体、粘稠液体:Problem:挥发液体(如:乙醇):产生挥发性气体=>:在白套筒室内形成负压,=>:从而产生漏液的情况,Solution:预洗四到六次,=>:让白套筒室内的气体达到饱和,=>:负压就会自动消失。粘稠(如:SDS、酶)=>:形成液膜量大=>:产生误差大。Solution:(预洗;=>吸头内壁会吸附一层液体,=>使表面吸附达到饱和,=>此时再吸入样液,则:最后打出液体的体积会很精确。)Slide18:外置活塞式移液器(Slide5)Slide201)相同温度:(?)移液之前:移液器、枪头和液体尽量处于相同温度→实际操作中较难实现(?);取液之前,所取液体应在室温(15℃~25℃)平衡。3)吸头浸入角度A浸入角度:吸头浸入角度控制在倾斜20度之内,保持竖直为佳;4)吸头浸入速度正确操作:移液操作应保持平顺、合适的吸液速度;错误操作:过快的吸液速度=>样品眺入套柄=>带来活塞和密封圈的损伤、样品的交叉污染。5)浸入深度:浸入过深=>液压=>对吸液的精确度产生一定的影响,当然:具体的浸入深度应据盛放液体的容器大小灵活掌握)吸头浸入深度建议如下所示:移液器规格吸头浸入深度P2、P10ul<or等于1mm;P20、P100、P200<or等于2mm,P1000ul<or等于3mm,Slide24:1)移液器严禁吸取强挥发性、强腐蚀性的液体。(如:浓酸、浓碱、有机物)2)两种移液方法:一:是前进移液法:第一停点→吸第二停点→放二:是反向移液法:1适用于:转移高粘液体、易起泡液体、极微量的液体。2原理:先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余的液体→多吸入的液体可以补偿吸头内部的表面吸附3程序:A先按下按钮至第二停点,B慢慢松开按钮至原点。C接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体,继续保持按住按钮位于第一停点(千万别再往下按),取下有残留液体的枪头,弃之。,反向吸液一般与预润湿吸液方式结合使用,适用于粘稠液体和易挥发液体。Slide263)设置补偿量:通过实验得出适用于:浓度和黏度大的液体作用:(同润洗)操作:浓度和黏度大的液体=>易产生误差=>,给予一定的补偿量→可以通过试验确定出补偿量=>改变读数窗的读书来调节。4)密封性A:密封老化或出现漏液,须及时更换密封圈。(视使用频率而定);B:给活塞涂润滑油5)检漏方法:吸液→1-3S后→观察:吸头内液面是否下降;IF:液面下降=>1、枪头是否匹配→Solution更换吸头;2、弹簧活塞是否正常→Solution更换活塞;3、液体是否易挥发(许多有机溶剂都如此),→Because:饱和蒸汽压所导致→Solution可以先吸放几次液体,然后再移液。4、以上情况都不是=>可能活塞组件有问题=>找专业维修人员修理
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