一、课题(kètí)目标二、课题(kètí)重点与难点三、课题背景(bèijǐng)分析四、基础知识分析(fēnxī)与教学建议（一）PCR原理(yuánlǐ)教学建议：（一）PCR原理(yuánlǐ)教学建议：（二）PCR的反应(fǎnyìng)过程（二）PCR的反应过程(guòchéng)教学建议：(一)PCR原理(yuánlǐ)解链→模板(múbǎn)变性引物-起始→引物-模板(múbǎn)复性子链延伸→子链延伸加样器的使用(shǐyòng)结果分析(fēnxī)与评价多聚酶链式反应(liànshìfǎnyìng)（PCR）扩增DNA片段一、实验(shíyàn)目的二、实验(shíyàn)原理PCR的基本原理(二)PCR的反应(fǎnyìng)过程三、实验材料(cáiliào)、器材及试剂PCR反应体系的五要素：引物、酶、dNTP、模板和Mg2+TaqDNA聚合酶来自水生栖热菌Thermusaquaticus良好(liánghǎo)的耐热性Mg2+依赖性无校读功能无菌薄壁管中顺序加入反应体系各成分(chéngfèn):双/三蒸水l10×缓冲液2.5l25mmol/LMg2+2.5l4×dNTP2.0l50umol/L引物12.0l50umol/L引物22.0l模板DNA1-2lTaqDNA多聚酶1.0l25.0l轻弹管壁，使各成分(chéngfèn)充分混匀！实验(shíyàn)操作（2）操作(cāozuò)提示产物(chǎnwù)的检测电泳结果有无目标条带出现(chūxiàn)，可判别+/-结果；根据条带宽度和亮度，可直观判断扩增产量；关于PCR假阴性、假阳性及非特异扩增问题。PCR扩增NGF基因(jīyīn)（大鼠）DNAMarkerPCR引物设计(shèjì)引物设计(shèjì)：PCR的反应(fǎnyìng)特点五、注意事项普通高中课程标准实验(shíyàn)教科书生物选修1生物技术实践专题4DNA与蛋白质技术(jìshù)课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段感谢您的观看(guānkàn)！内容(nèiróng)总结