1.掌握电泳法分离蛋白质的原理；2.掌握醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白的原理和方法；3.进一步熟悉721型分光光度计的使用（一）电泳技术(electrophoresis)一、电泳的原理电泳速度:带电粒子在电场中运动时，单位电场强度内粒子运动的速度，以u表示，即二、影响电泳速度的因素2.缓冲溶液：电场强度：电泳支持物上每厘米的电位降，也称电势梯度。4.支持介质：负极（一）按支持物的物理性状不同，区带电泳可分为：1．滤纸及其它纤维(如玻璃纤维、醋酸纤维、聚氯乙烯纤维薄膜)电泳2．粉末电泳：如纤维素粉、淀粉电泳；3．凝胶电泳：如琼脂、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶电泳；4．丝线电泳：尼龙丝、人造丝电泳。（二）按支持物的装置形式不同，区带电泳可分为：(三)按pH的连续性不同，区带电泳可分为：1．连续pH电泳：即整个电泳过程pH保持不变，如常用的纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳等。2．非连续pH电泳：缓冲液和电泳支持物间有不同的pH的电泳，如聚丙烯酰胺凝胶盘状电脉，等电聚焦电泳等。（二）血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳【实验原理】血清蛋白依次分为清蛋白，球蛋白的α1、α2、β、γ五个区带膜条经过氨基黑10B染色后显出清晰色带。3.血清蛋白电泳结果的临床意义：1．准备与点样：1．计算出各部分蛋白质占总蛋白质的百分数。清蛋白％＝（2A/∑T）×100％α1球蛋白％＝（α1/∑T）×100％α2球蛋白％＝（α2/∑T）×100％β球蛋白％＝（β/∑T）×100％γ球蛋白％＝（γ/∑T）×100％1.点样面为不光滑面，勿用手触摸感知；2.点样量适中，垂直点样；3.点样端接电泳仪负极；4.膜条与滤纸需贴紧，拉直；5.谨防触电。1．在本实验电泳过程中，正负电极各发生什么反应?电极附近的缓冲液有什么变化?2.电泳时，点样端置于电场的正极还是负极？为什么？3.除利用电泳法分离蛋白质以外,还有哪些分离方法?4.简单绘制血清蛋白电泳后的谱图。5.电泳后各区带应明显分开,如分离不清或不整齐,试分析其可能存在的原因。1.蛋白质的理化性质？2.蛋白质的盐析？3.蛋白质的显色反应有哪些？4.分离蛋白质的方法有哪些？5.层析技术的分类及各自的原理。6.透析的原理？2.缓冲溶液：（二）血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳【实验原理】膜条经过氨基黑10B染色后显出清晰色带。1．计算出各部分蛋白质占总蛋白质的百分数。清蛋白％＝（2A/∑T）×100％α1球蛋白％＝（α1/∑T）×100％α2球蛋白％＝（α2/∑T）×100％β球蛋白％＝（β/∑T）×100％γ球蛋白％＝（γ/∑T）×100％1.蛋白质的理化性质？2.蛋白质的盐析？3.蛋白质的显色反应有哪些？4.分离蛋白质的方法有哪些？5.层析技术的分类及各自的原理。6.透析的原理？