专题30生物技术在其他方面的应用考点一植物的组织培养技术二植物组织培养1.含义:植物组织培养就是取一部分植物组织,如叶、芽、茎、根、花瓣或花粉等,在无菌条件下接种在三角瓶中的琼脂培养基上,给予一定的⑤温度和光照,使之产生愈伤组织,进而生根发芽。2.过程1.MS培养基(植物组织培养用的培养基)的成分及各成分的作用②使用顺序不同,结果不同,具体见表知能拓展植物组织培养过程中脱分化与再分化的比较3.菊花茎与月季花药组织培养的比较知能拓展(1)菊花的组织培养实验中,应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝;月季花药的离体培养实验中,应选择单核靠边期的花药。(2)植物组织培养过程应该在无菌的条件下进行,外植体消毒所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液,所使用的例1(2017江苏苏州上学期期初测试,22)关于花药离体培养的说法,不正确的是 ()A.接种的花药形成愈伤组织或胚状体后,要适时更换培养基,以便进一步分化形成植株B.确定花粉发育时期最常用的是焙花青—铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色C.接种花药后一段时间内不需要光照,但幼小植株形成后需要光照D.材料消毒时需先用酒精浸泡,然后在无菌水中清洗,再放入氯化汞或次氯酸钙溶液中浸泡,最后再用无菌水冲洗考点二特定成分的提取与分离2.纯化与纯度鉴定二植物有效成分的提取1.玫瑰精油的提取2.橘皮精油的提取3.胡萝卜素的提取三DNA的粗提取与鉴定1.实验原理2.操作流程四PCR技术1.PCR原理: DNA复制原理,即:2.PCR反应过程1.DNA与蛋白质在物理化学性质方面的差异例2(2015江苏单科,25,3分)图1、2分别为“DNA的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示意图,下列叙述正确的是(多选) () A.图1、2中加入蒸馏水稀释的目的相同B.图1中完成过滤之后保留滤液C.图2中完成过滤之后弃去滤液D.在图1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质 解析图1加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破,图2加入蒸馏水的目的是稀释NaCl溶液,A错误;图1中加入蒸馏水后,DNA存在于滤液中,B正确;图2中加入蒸馏水后,NaCl溶液浓度降低,DNA析出,所以弃去滤液,C正确;嫩肉粉主要成分是蛋白酶,鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉可将蛋白质水解成小分子肽或氨基酸,除去蛋白质,D正确。 答案BCD2.蛋白质的分离方法(1)凝胶色谱法:①概念:根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。②原理(2)电泳法①概念:指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。②原理:在一定的pH下,多肽、核酸等生物大分子的可解离基团会带上正电或负电,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。③作用过程④方法:常用的电泳方法有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。测定蛋白质分子量时通常使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。例3以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确的是 ()A.洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测D.在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢 解析猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少,是提纯血红蛋白的理想材料。提纯血红蛋白分四步:红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析,其中洗涤红细胞时,要用生理盐水反复洗涤,既要将红细胞洗涤干净,又要不破坏红细胞,然后再用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂,释放出血红蛋白。分离提纯血红蛋白时用凝胶色谱法,是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的,相对分子质量大的蛋白质移动速度较快;血红蛋白的颜色可用于观察红色区带的移动情况,并据此判断分离效果。故D不正确。 答案D3.蒸馏、压榨与萃取的比较例4(2013山东理综,34,8分)胡萝卜素是一种常用的食用色素,可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得,流程如下: (1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时,可选用或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环,其目的是。(2)培养酵母菌R时,培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供和。(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好温度和以防止胡萝卜素分解;萃取过程中宜采用方式加热以防止温度过高;萃取液浓缩前需进行过滤,其目的是。(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素,鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为。 解析(1)微生物分离和培养中常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。微生物培养需要无菌操作,其中对接种针需进行灼烧灭菌处理。(2)蔗糖和硝酸盐可分别为微生物的生长提供碳源和氮源。(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过