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第七章其它体外放射分析目的要求:掌握这些方法放射分析法的基本原理,了解它们的方法学。其它受体外放射分析包括竞争性蛋白结合分析、放射受体分析和放射酶法分析。以上方法都以放射性核素标记物为示踪剂,通过待测物对试剂的竞争结合,或酶对底物的催化不实现待测物的定量分析。第一节竞争性蛋白结合分析竞争性蛋白结合分析(CPBA)在方法原理与RIA相同,而只是所用结合剂不同,CPBA是以天然存在于血浆或组织的具有较强待异结合能力的蛋白质为结合剂。本节应了解方法学CPBA方法的优缺点,了解方法学。第二节放射受体分析以受体为特异性结合剂、利用竞争性结合的原理、对配体进行检测的体外放射分析方法称为放射受体分析(RRA)。RRA的测定原理与RIA相同,即各种配体如抗原那样,能与抗体一样的特异性结合剂——受体相结合,通过标记配体与非标记配体的竞争抑制反应,检测出待测配体的含量。其测定方法与RIA相似。第三节酶的放射分析酶的放射分析是根据放射性核素标记底物经酶促反应转变为标记产物而设计一类微量分析方法。本节了解内容如下:一、酶活性放射分析(一)基本原理(二)基本方法和步骤1、酶液制备2、标记底物制备3、酶促反应条件的选择4、终止反应的方法5、产物分离方法6、测量数据处理(三)酶的放射分析的主要优点有:灵敏度高、特异性强、适用范围广了解酶的放射分析的缺点。二、酶的底物放射分析了解酶的底物放射分析,与酶的活性分析一样,也是建立在酶促反应基础上的微量分析方法。当酶为定量,底物中待测物为变量时,既可测定酶促反应速度,也可测定底物化学的反应完全时的底物或产物的变化量。可分为:1、竞争性酶的底物放射分析2、非竞争性酶的底物放射分析非竞争性酶的底物放射分析适用于双(或多)底物酶促反应。
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